PCR實驗方法步驟：
路鄧葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：路鄧葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Staphylococcus lugdunensis
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
Hut-78細胞，皮膚T細胞瘤 人平滑肌,T/G細胞 人低侵襲性脈絡膜色素素瘤細胞;OCM-1ASulfo NHS;N-羥基硫代琥珀質量規格：>99%,BRsulfo-NHS

A9(小鼠皮下結締組織細胞) 5×106cells/瓶×2亞甲蘭,亞甲基藍質量規格：BSMethylene Blue

PVRL2 Others Human 人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸沃尼妙林質量規格：>97%,BRValnemulin HCl

水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S51酸泰樂菌素質量規格：>95%,BRTylosin phosphate

DKKL1 Others Human 人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 白鮮堿(標準品)質量規格：HPLC≥98%,標準品Dictamnine
平滑肌細胞生長添加物-無血清SMCGS-sf滅草隆（標準品）質量規格：分析標準品Monuron

TE 353.Sk細胞，人正常皮膚細胞 人胚腎上皮包裝細胞,GP2-293細胞 原代滑膜皮細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml煙嘧磺隆（標準品）質量規格：分析標準品Nicosulfuron

山羊腎上皮樣細胞;DG-K1鈮標準溶液(1000μg/ml)質量規格：1000μg/mlNiobium standard

REN Others Human 人 RENIN 人細胞裂解液 (陽性對照) 鎳標準溶液(100μg/mL，基體:1%HNO3)質量規格：100μg/mL，基體:1%HNO3Nickel Standard

CM-M125小鼠牙細胞完全培養基100mL鉀標準溶液(500mg/L,溶劑：水)質量規格：500mg/L,溶劑：水Potassium standard
大鼠肝細胞;BRL 3A羧甲基葡聚糖凝膠C-25200u保存：-20℃

人心肌細胞 (HCM) (1×106 )2,4-二錄-5-氧基本安 2,4-Dichloro-5-mqthoxycnilinq 98446-49-

CL-0003293A (人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2微量可調移液器P100025克

小鼠小膠質細胞;BV2 小鼠成纖維細胞完全培養基 100mL焦鉀shēng huà shì jì容量：500克

人臍動脈平滑肌細胞 Human83949-45-52-酚-3,7-二磺酸二鈉Diwo7ium 2-naphthol-3,7-disulfonate
路鄧葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒人細胞;Hela S3 [HeLaS3] 大鼠大隱平滑肌細胞完全培養基 100mL5-乙酰水楊酸5-Acetylsalicylic acid質量規格：美國進口

AtT20 小鼠細胞N-芐基甘氨酸N-Benzylglycine質量規格：>98.0%,BR

VSIG4 Others Human 人 VSIG4 人細胞裂解液 (陽性對照) 扎那米韋Zanamivir質量規格：>98%,BR,一水物

人癌細胞;MDA-MB-435S扎那米韋(標準品)Zanamivir質量規格：HPLC≥98.0%,標準品

IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人細胞裂解液 (陽性對照) 去氧氟尿苷/5'-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine質量規格：>99%,BR

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。