PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：傘枝梨頭霉PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

Schleicheol 2  中文名：  分子式：C30H52O2    大鼠白三烯C4elisa試劑盒   大鼠白三烯C4試劑盒   規格型號：96T/48T   大鼠白三烯C4試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：大鼠白三烯C4試劑盒、大鼠白三烯C4 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  

Schleicheol 1  中文名：  分子式：C30H52O2    植物維生素C(VC)ELISAkit  

S-Benzyl-L-cysteine  中文名：S-芐基-L-半胱氨酸  分子式：C10H13NO2S    α-銀環蛇(α-BGT)ELISAKit  

Sarsasapogenin  中文名：菝葜皂苷元  分子式：C27H44O3    大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)ELISAKit  

Sarmentocymarin  中文名：  分子式：C30H46O8    霉(AFT)ELISAKit
Pregnenolone  145-13-1  中文名：孕烯醇酮  分子式：C21H32O2    People androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 人雄(ASD)ELISA試劑盒

組織總0含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣              4-(4-Aminophenyl)morpholin-3-one  中文名：  分子式：C10H12N2O2 

組織因子抑制物 (TFPI)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  Quinestrol  中文名：炔雌醇環戊醚  分子式：C25H32O2  度：98.0%

組織因子抑制物   英文名稱：    tissue factor protein inhibitor   規格：   48T/96T   英文縮寫：   TFPⅠ  Quinocetone  中文名：喹烯酮  分子式：C18H14N2O3 

組織因子   英文名稱：    tissue factor   規格：   48T/96T   英文縮寫：   TF  Quinocetone  中文名：喹烯酮  分子式：C18H14N2O3  度：98.0%
傘枝梨頭霉PCR檢測試劑盒直銷油酸酰胺(>65.0%(GC))  Oleamide  質量規格：>65.0%(GC) 英文名稱RatActi-vatedproteinCELISAKit大鼠活化蛋白C規格：96T/48T

正辛酰胺(>98.0%(GC)(N))  n-Octanamide  質量規格：>98.0%(GC)(N) 酵母菌SD-P/HIS培養基100毫升

硬脂酰胺(>90.0%(GC))  Stearamide  質量規格：>90.0%(GC) ELISAKitCA人酶規格：48T/96T

丁基鄰苯二甲酰羥乙酸丁酯(>95.0%(GC))  Butyl Phthalyl Butyl Glycolate  質量規格：>95.0%(GC) 小鼠蛋白Z(PROZ)ELISA試劑盒 ，英文名： PROZ ELISA Kit

間苯二酸雙(2-乙基己基)酯(>98.0%(GC))  Bis(2-ethylhexyl) Isophthalate  質量規格：>98.0%(GC) 人前白蛋白(PA)ELISA檢測試劑盒Humanprealbumin,PAELISAKit 96T/48T

三戊酯(>98.0%(GC))  Triamyl Phosphate  質量規格：>98.0%(GC) 大鼠內皮型合成酶(eNOS/NOS3)試劑盒 Rat Endothelial niic oxide syhase,eNOS/NOS3 ELISA Kit

三(2-氯乙基)酯(>97.0%(GC))  Tris(2-chloroethyl) Phosphate  質量規格：>97.0%(GC) 英文名稱RatBradykinin(BK)ELISAKit大鼠緩激肽酶聯分析(BK)ELISAKit規格：96T/48T

三(1,3-二氯-2-丙基)酯(>95.0%(GC))  Tris(1,3-dichloro-2-propyl) Phosphate  質量規格：>95.0%(GC) 酵母菌SD-P/URA培養基100毫升

三(2-氧乙基)酯(>95.0%(GC))  Tris(2-butoxyethyl) Phosphate  質量規格：>95.0%(GC) ELISAKit親環蛋白人肽酰脯氨酰異構酶規格：48T/96T

2-乙基己基二苯酯(>90.0%(GC))  2-Ethylhexyl Diphenyl Phosphate  質量規格：>90.0%(GC) 小鼠蛋白p53(TP53)ELISA試劑盒 ，英文名： TP53 ELISA Kit
7,8-二氫-L-生物蝶呤  7,8-Dihydro-L-biopterin  質量規格：美國進口 豬血纖蛋白原(Fbg)ELISA檢測試劑盒PorcineFibrinogen,FbgELISAKit 96T/48T

生物蝶呤-d3  Biopterin-d3  質量規格：美國進口 豬血小板活化因子(PAF)ELISA檢測試劑盒Porcineplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 96T/48T

(6R)-四氫-L-硫酸生物蝶呤-d3(非對映)  (6R)-Tetrahydro-L-biopterin-d3 Sulfate(Mixture of Diastereomers)  質量規格：美國進口 豬(INS)ELISA檢測試劑盒PorcineInsulin,INSELISAKit 96T/48T

(6S)-四氫-L-二硫酸生物蝶呤  (6S)-Tetrahydro-L-biopterin Disulfate  質量規格：美國進口 豬樣生長因子1(IGF-1)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactors-1,IGF-1ELISAKit 96T/48T

(6S)-四氫-L-硫酸生物蝶呤  (6R)-Tetrahydro-L-biopterin Sulfate  質量規格：美國進口 豬樣生長因子2(IGF-2)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISAKit 96T/48T

四氫生物蝶呤(THB)二鹽酸  Tetrahydrobiopterin (THB) dihydrochloride  質量規格：美國進口 豬樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit 96T/48T

鹽酸決奈達隆  Dronedarone HCl  質量規格：美國進口 豬載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測試劑盒PorcineapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 96T/48T

鹽酸決奈達隆-d6  Dronedarone-d6 HCl  質量規格：美國進口 豬載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA檢測試劑盒PorcineapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T

去丁基鹽酸決奈達隆-d6  Desbutyl Dronedarone-d6 HCl  質量規格：美國進口 豬脂聯素(ADP)ELISA檢測試劑盒Porcineadiponectin,ADPELISAKit 96T/48T

O-脫芳香基雷諾嗪  O-Desaryl Ranolazine  質量規格：美國進口 豬主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA檢測試劑盒swinemajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡELISAKit 96T/48T
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。