PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：同牛病毒2型牛乳頭炎病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

綠膿桿菌(PA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  3-Quinuclidinone  3731-38-2  中文名：3-奎寧環酮  分子式：C7H11NO 

綠膿桿菌(PA)核酸檢測試劑盒   48T  3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid  中文名：  分子式：C19H29NO3  度：98.0%

鹿胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)ELISAKit     3-Benzalphthalide  575-61-1  中文名：3-亞芐基苯酞  分子式：C15H10O2 

鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISAKit                 3-Aminopiperidine dihydrochloride  中文名：  分子式：C5H14Cl2N2 

鹿內皮型合成酶(eNOS)ELISAKit     3-Aminopiperidine dihydrochloride  中文名：  分子式：C5H14Cl2N2  度：98.0%
Androstenediol-3-acetate  1639-43-6  中文名：雄甾烯二醇-3-乙酸酯  分子式：C21H32O3    人鐵蛋白(FE)酶聯吸附測定試劑盒   Human FE (Ferritin) ELISA Kit               

Methenolone enanthate  303-42-4  中文名：美替諾龍庚酸酯  分子式：C27H42O3    人組織因子(TF)ELISA試劑盒  

Methenolone acetate  434-05-9  中文名：美替諾龍醋酸酯  分子式：C22H32O3    人組織型纖維溶酶激活物（t-PA）ELISA試劑盒  

Androst-2-en-17-one  963-75-7  中文名：5α-雄甾-2-烯-17-酮  分子式：C19H28O    人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒  

Epiandrosterone  481-29-8  中文名：表雄酮  分子式：C19H30O2    人組織相容性復合體Ⅰ類相關基因D（MICD）ELISA試劑盒
同牛病毒2型牛乳頭炎病毒PCR檢測試劑盒供應具棲冬青苷(標準品)  Pedunculoside  質量規格：HPLC≥98%，標準品 Porcinegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISA試劑盒豬生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒規格：96T/48T

科羅索酸（標準品）  Corosolic Acid  質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒 ，英文名： LPO ELISA Kit

可可堿（標準品）  Theobromine  質量規格：≥99%，標準品 大鼠內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA檢測試劑盒RatEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 96T/48T

苦參堿(標準品)  Matrine  質量規格：HPLC≥98%，標準品 人氨酸轉氨酶/谷轉氨酶(ALT/GPT)試劑盒 Human ALT/GPT ELISA Kit

苦參堿  Matrine  質量規格：≥97%,BR Ratulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA試劑盒規格：96T/48T

D-(-)-奎寧酸（標準品）  D-(?)-Quinic acid  質量規格：≥98%，標準品 NAD濃度比色法定量檢測試劑盒20/80

辣椒堿,辣椒素（天然提取標準品）  Capsaicin  質量規格：辣椒堿含量HPLC≥98%,標準品 Porcinegrowthhormone,GHELISA試劑盒豬生長激素(GH)ELISA試劑盒規格：96T/48T

辣椒堿,辣椒素(天然提取)  Capsaicin  質量規格：辣椒總堿>98%,辣椒單堿>55% 小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒 ，英文名： PPAR-γ ELISA Kit

辣椒堿,辣椒素(合成)  Capsaicin  質量規格：>99% 大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA檢測試劑盒Ratα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit 96T/48T

萊苞迪甙C（標準品）  Rebaudioside C  質量規格：HPLC≥98%，標準品 人別孕烯醇酮/3α,5α-四氫孕酮(AP/3α,5α-THP)試劑盒 Human allopregnanolone/3α,5α-teahydroprogesterone,AP/3α,5α-THP ELISA kit
白鮮堿(標準品)  Dictamnine  質量規格：HPLC≥98%,標準品 人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA檢測試劑盒HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISAKit 96T/48T

羅替戈汀  Rotigotine  質量規格：>95%,BR 人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA檢測試劑盒HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISAKit 96T/48T

鹽酸羅替戈汀  Rotigotine Hydrochloride  質量規格：>97%,BR 人細胞外基質0酸糖蛋白(MEPE)ELISA檢測試劑盒Humanmaixexacellularphosphoglycoprotein,MEPEELISAKit 96T/48T

右雷佐生鹽酸鹽;右丙亞胺鹽酸鹽  Dexrazoxane HCl  質量規格：>99%,BR 人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA檢測試劑盒Humanplasmin/fibrinolysin,PL/FbnELISAKit 96T/48T

SGI-1776  SGI-1776；SGI1776  質量規格：>98%,Pim1抑制劑 人纖調蛋白(fibromodulin)ELISA檢測試劑盒HumanfibromodulinELISAKit 96T/48T

JNJ-26854165 (Serdemetan)  JNJ 26854165  質量規格：>98% 人纖維介素蛋白(fgl2)ELISA檢測試劑盒HumanFibrinogenlikepeptide2,fgl2ELISAKit 96T/48T

SB505124  SB-505124  質量規格：>98% 人纖維連接素相關抗原(FRA)ELISA檢測試劑盒Humanfibronectioelatedaigen,FRAELISAKit 96T/48T

NLG919  NLG-919  質量規格：>98%,IDO抑制劑 人纖維母細胞表面抗原(FSP)ELISA檢測試劑盒HumanFibroblastsurfaceprotein,FSPELISAKit 96T/48T

維莫德吉(GDC0449)  Vismodegib;GDC-0449  質量規格：>98%,hedgehog抑制劑 人酰輔酶A羧化酶β多肽(PCCB)試劑盒 Human PCCB ELISA Kit

Zosuquidar；LY335979  LY-335979  質量規格：>98% 人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA檢測試劑盒HumanAcylationStimulatingProtein,ASPELISAKit 96T/48T
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。