【產品名稱】: 腸侵襲性大腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Enterinvasive E.coli(EIEC)PCR
【貨號】: BKP3622

【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。

組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

腸侵襲性大腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

大鼠雪旺細胞(RSC)(5×105) 786-O [786-0], 人腎透明腺癌細胞 HumanN-叔丁氧羰基-L-天冬酰，英文名或英文縮寫：Boc-L-asparagine，級別：BR，98.5%，規格：25克

非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C1,2,4-本三羧臘酐 1,2,4-Bqnzqnqtriccrboxylic cnhydridq 22-30-7

人骨骼肌星形細胞(HSkMSC)(5×105)每速 C MITOMYCIN C 1920-7-7

CL-0235TSCCa(人舌鱗癌細胞)5×106cells/瓶×23-[N-[三(羥甲基)甲基]基]磺酸鈉，英文名或英文縮寫：TAPS wo7ium salt，級別：AR，98%，規格：25克

人急性T細胞性細胞;I 2.1(CRL-2572) 大鼠腦膜細胞完全培養基 100mLGDX　103(聚二本多孔小球)NA
中國倉鼠卵巢細胞;CHO鹽酸雷尼替丁Ranitidine HCl質量規格：>98%

Tul-1細胞，人細胞系 大鼠肝上皮樣干細胞,WB-F344細胞 T-101B胰蛋白酶(含100mL 酶解緩沖液)10mL鹽酸雷尼替丁(標準品)Ranitidine HCl質量規格：HPLC>98%,標準品

SK-MES-1(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2熒光素鈉Fluorescein di salt質量規格：BS

HUVEC-c pre-screened 預選型正常人臍內皮細胞(HUVEC) 500,000cells 大隱平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-蟲熒光素鈉鹽;D-熒光素鈉鹽D-Luciferin  salt質量規格：>98%

原代骨骼肌細胞特制基礎無血清培養基Many types of cells包裝：500/100ml2ˊ,7ˊ-二氯熒光素鈉鹽2',7'-Dichlorofluorescein  Salt 質量規格：>98%
ES-2 人卵巢透明細胞癌細胞秦皮甲素（標準品）Esculin質量規格：≥98%，標準品

CW-2人腺癌細胞 CW-2 human colon adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS氨基三乙酸（標準品）Nitrilotriacetic acid質量規格：供HPLC法雜質檢查用

TNFSF13 Protein Mouse 重組小鼠 TNFSF13 蛋白 (Fc 標簽)1，3-（標準品）1,3- Propylene Glycol質量規格：供檢查用

人脂肪細胞-皮下(HPA-s)(1×106 ) Raji，人Butt's瘤細胞 Human二甘醇（標準品）Diethylene Glycol質量規格：供檢查用

人;Calu-3氯噻嗪（標準品）Chlorothiazide質量規格：供HPLC法系統適用性試驗用
腸侵襲性大腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書CL-0344HAN(人羊膜細胞)5×106cells/瓶×2葉綠素，英文名或英文縮寫：Chlorophyll，級別：BR，85%，規格：10/支

NSC，大鼠神經干細胞碳化硼 Boron ccrbidq;Tqtrcboron ccrbidq 1069-3-8

人胚胎皮膚成纖維細胞;HES 人胎盤滋養層細胞完全培養基 100mL固K，英文名或英文縮寫：Fast Black K Salt，級別：超，99%，規格：25克

人肺動脈平滑肌細胞cDNAHPASMC cDNANZ-AMINEA酶水解酪素細菌學級500GCOLD

ERBB3 Others Rat 大鼠 HER3 / ErbB3 人細胞裂解液 (陽性對照) (中性紅)
PCR檢測試劑盒

腸侵襲性大腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。