技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：大片吸蟲PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
MRC-5人胚肺細胞 MRC-5 in human embryo lung cells MEM+10% FBSROSANILINECHLORIDE堿性品紅(中文名稱對嗎)*綠色閃光粉末RTsigma

INHBA Protein Mouse 重組小鼠 Inhibin beta A / INHBA / Activin A 蛋白 (His 標簽)扁桃酸 Mandelic acid,99% 90-64-2 100G 通用試劑

人膀胱基質成纖維細胞(HBdSF)(5×105) 人絨毛間充質成纖維細胞 Human錄化血紅速;錄高鐵血紅速;血晶;言醋血紅速 HqMin;HqMctinq xy7nochloridq;HqMin chloridq;Chloroprotoporphyrin IX iron(III);1,3,5,8-TqtrcMqthy1-2,4-divinylporphinq-6,7-dipropionic ccid fqrrichloridq;ChlorohqMin;Chlorofqrriprotoporphyrin;FqrrihqMq chloridq;Fqrriporphyr in chloridq 16009-13-2

大鼠骨骼肌成肌細胞;L6N-Hexadecane正十六烷*無色液體RTsigma

AFP Others Human 人 AFP / alpha-fetoprotein 人細胞裂解液 (陽性對照) 110-40-7癸二酸二乙酯;皮脂酸乙酯Dietxyl Sebacate;Decanedioic acid dietxyl ester
小鼠心肌細胞MCM外消旋心得安-d7rac Propranolol-d7質量規格：美國進口

EFNA5 Others Canine 狗 Ephrin-A5 / EFNA5 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-羥基鹽酸心得安5-Hydroxy Propranolol Hydrochloride質量規格：美國進口

人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2(R)-4-羥基鹽酸心得安(R)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride質量規格：美國進口

NCI-H446細胞，人小細胞細胞 大鼠神經細胞,C6細胞 CM-H111人成骨細胞完全培養基100mL(S)-4-羥基鹽酸心得安(S)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride質量規格：美國進口

P815(小鼠肥大細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2(+/-)-4-羥基鹽酸心得安(+/-)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride質量規格：美國進口
大片吸蟲PCR檢測試劑盒說明書人表皮色素細胞-HEM-a吉非羅齊1-O-β-葡萄糖苷酸-d6Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide-d6質量規格：美國進口

DAPK1 Others Human 人 DAPK1 / DAP Kinase 1 (aa 1-363) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-去甲基昂丹司瓊N-Demethyl Ondansetron質量規格：美國進口

兔角膜后基質層成纖維細胞;RCBBF6-羥基昂丹司瓊6-Hydroxy Ondansetron質量規格：美國進口

Y1細胞，腎上腺皮質細胞 人細胞,MIApaca-2細胞 CM-M008小鼠成纖維細胞完全培養基100mL8-羥基昂丹司瓊8-Hydroxy Ondansetron質量規格：美國進口

大鼠細胞;UMR-106奧昔康唑Oxiconazole質量規格：美國進口
QSG-7701細胞，人胚肝細胞正常 人APP-PS1雙基因轉染CHO細胞株,7WPS1細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆); EPO-CHO-T7-酮基去氫表雄酮質量規格：>98%7-Keto-dehydroepiandrosterone

LLC-MK2(恒河猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2硝酸銣質量規格：>99%Rubidium nitrate

Promocell Drosophila Schneider's Drosophila Medium果蠅培養基，無L-谷氨酰胺 500mlCHIR-99021 (CT99021.HCl)質量規格：>99%,GSK-3α/β抑制劑CHIR-99021 (CT99021) HCl

人主動脈平滑肌細胞總RNAHASMC NA駱駝蓬堿;駱駝蓬靈;哈梅靈(標準品)質量規格：HPLC≥98%，標準品Harmaline;Dihydroharmine

CFD Others Mouse 小鼠 CFD / Adipsin 人細胞裂解液 (陽性對照) JNJ-26854165 (Serdemetan)質量規格：>98%JNJ 26854165