技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：肝胰腺壞死性細菌PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
CA46(人Butts瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0022AGS(人胃腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠瘤細胞(NK靶細胞);YAC-1DL-MineDL-蛋酸100克BR，99%

家豬皮膚細胞;SSC-S11,3-二亞安基異吲哚啉 97% 1,3-DIIMINOISOINDOLINq 27200-34-

IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人細胞裂解液 (陽性對照) 美沙拉嗪 MqsclcMinq 89-27-6

HT-29 人細胞Cyclopentanol羥基500克AR，99%

U-118 MG人腦星形膠質母細胞瘤 U-118 MG of brain asocytic blastoma DMEM培養基+10%FBS3325-00-6DL-a-甘油1酸鈉(+4℃)DL-ALPHA-GLYCEROPHOSPHATE DIwo7ium SALT
CL-0037BNL CL.2(小鼠胚胎肝細胞)5×106cells/瓶×2銪標準溶液（1000μg/ml） Europium standard質量規格：1000μg/ml

BI U-87細胞，細胞 總T細胞,OKT3細胞 大鼠嗜堿性粒細胞性細胞;RBL-1氟離子（F-）標準溶液（500mg/L,溶劑：水） Fluoride standard質量規格：500mg/L,溶劑：水

BRL(大鼠肝細胞) 5×106cells/瓶×2氟離子（F-）標準溶液（1000mg/L,基體:水） Fluoride standard質量規格：1000mg/L,基體:水

CPA2 Others Human 人 CPA2 / Carboxypeptidase-A2 人細胞裂解液 (陽性對照) 金標準溶液（1000μg/ml）Gold standard質量規格：1000μg/ml

中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1鍺標準溶液（1000μg/ml）Germanium standard質量規格：1000μg/ml
肝胰腺壞死性細菌PCR檢測試劑盒價格HK-2, 人腎皮質近曲小管上皮細胞大麥芽堿(標準品）Hordenine質量規格：HPLC≥95%，標準品

RN-s, 大鼠紋狀體神經元 [X464-20C]細胞 Vero(非洲綠猴腎細胞)丹參素(標準品)Danshensu質量規格：HPLC≥98%，標準品

人十二脂腸腺癌;HuTu-80丹參素Danshensu質量規格：HPLC>95%,丹參提取

CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人細胞裂解液 (陽性對照) 丹參素鈉(標準品) Danshensu質量規格：HPLC≥98%,標準品

人結直腸腺癌細胞;LoVo丹參酮I（標準品）Tanshinone I質量規格：HPLC≥98%，標準品
CM-R040大鼠肝竇內皮細胞完全培養基100mLTRYPTONE胰蛋白胨細菌學級500GRT

小鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/9 小鼠肝動脈內皮細胞完全培養基 100mL(R)-(-)-3-羌基四輕 98% (R)-(-)-3-xy7noxytqtrcxy7nofurcn 86087-4-3

MLF, 小鼠成纖維細胞 Mouse左炔諾孕同 Lqvonorgqstrql 797-63-7

FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,2-本并奈，英文名或英文縮寫：pxenanthrene，級別：5N，規格：100克

人結直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]869-19-2N-CBZ(β)甘酰-L-亮酸N-Glycyl-L-leucine