PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)服務內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：乙型副傷寒沙門氏菌PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

5,6,7,7a-Tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine-2(4H)-one   中文名：  分子式：C7H10ClNOS       英文名稱：   Mouse NO niic oxide   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   NO

5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione  中文名：  分子式：C19H18N2O3S    小鼠核轉(zhuǎn)錄因子   英文名稱：   Nuclear anscription Factor NF-KB   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   NF-κB

5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde  中文名：  分子式：C26H17ClFN3O3    小鼠核因子-κB亞基ρ65親和肽   英文名稱：   Nuclear anscription Factor NF-Κb ρ65   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   NF-Κb ρ65

5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate  中文名：  分子式：C22H25N3O2    小鼠神經(jīng)生長因子   英文名稱：    nerve growth factor    規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   NGF

5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide  中文名：  分子式：C13H15N3O2    氧化酶（XOD）測試盒（比色法）
蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  4-Amino-N-methylbenzamide  6274-22-2  中文名：4-氨基-N-甲基苯甲酰胺  分子式：C8H10N2O 

蘇木素染液   Fast HE tissues and exfoliated cells of dye  4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine  145783-14-8  中文名：  分子式：C7H7Cl2N3O2S 

松弛素-2   英文名稱：   Human Relaxin-2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   RLN-2  4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene  中文名：4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪  分子式：C28H18N2O2  度：98.0%

四硼酸   5kg  4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane  中文名：  分子式：C11H11NO2  度：98.0%

四甲基聯(lián)   5g  4-(Phenylthio)benzyl alcohol  中文名：  分子式：C13H12OS  度：98.0%
乙型副傷寒沙門氏菌PCR檢測試劑盒供應PC-3人細胞 Human prostate cancer PC-3 cells F-12培養(yǎng)基+10%FBS鹽酸苯海索（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Benzhexol hydrochloride

SCG2 Protein Human 重組人 SCG2 / Secretogranin II 蛋白 (His 標簽)葉酸（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Folic acid

小鼠腹脊髓神經(jīng)細胞(MN-vsc)(1×106) lovo, 人細胞 Human葡萄糖酸鈣(標準品)質(zhì)量規(guī)格：檢查Calcium gluconate

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163雙羥萘酸噻嘧啶（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Pyrantel pamoate

VNN1 Others Mouse 小鼠 VNN1 / Vanin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢唑啉,唑啉頭孢菌素質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRCefazolin
CHL1 Others Human 人 CHL1 / CALL 人細胞裂解液 (陽性對照) 酸性羅丹明B，英文名或英文縮寫：Lissamine rhodamine B，級別：BS，規(guī)格：1克

人周細胞RNAHBVP miRNA5 μg頭孢坐林內(nèi) Cqfczolin 2923-19-9

PLA2G12B Others Mouse 小鼠 PLA2G12B / PLA2G13 人細胞裂解液 (陽性對照) L-MINEL-甲(蛋酸)美國藥典級白色至米白色粉末COLDsigma

Kyse510 人細胞2-環(huán)己基乙磺酸，英文名或英文縮寫：CHES，級別：IND，規(guī)格：100克

CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2Agar,Bacterological 100g 日本分裝
反應五要素：
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。