PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：柯拉松血吸蟲PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

5-Benzyl-1H-tetrazole  18489-25-3  中文名：5-芐基-1H-四唑  分子式：C8H8N4O    計數(shù)液   Alkaline phosphatase stain

Benzyl 4-hydroxybenzoate  94-18-8  中文名：4-羥基苯甲酸芐酯  分子式：C14H12O3       Acid phosphatase stain

(-)-Noe's Reagent  108031-79-4  中文名：(-)-核歐沃豪斯效應試劑  分子式：C24H38O3    定性測試盒   Acid esterase stain               

2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane  2024-88-6  中文名：2,2-雙(4-氯甲酰氧苯基)丙烷  分子式：C17H14Cl2O4    嗜肺軍團桿菌(LP)核酸檢測試劑盒   48T

3,6-Bis(hydroxymethyl)durene  7522-62-5  中文名：3,6-雙(羥甲基)杜烯  分子式：C12H18O2    綠膿桿菌(PA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T
兔p物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide  83846-85-9  中文名：4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚  分子式：C20H16OS  度：98.0%   

兔p物質(zhì)(SP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile  中文名：  分子式：C7H5ClN2O2 

兔p53(p53)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide  83846-85-9  中文名：4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚  分子式：C20H16OS 

兔p53(p53)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde  231278-84-5  中文名：  分子式：C26H17ClFN3O3 

兔I型膠原(rabbit Collagen I)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  4-Aza-*ndrostan-1-ene- 3-one-17carboxylic acid  140700-63-6  中文名：  分子式：C19H27NO3  度：98.0%  關鍵詞：
柯拉松血吸蟲PCR檢測試劑盒供應OLFM4 Others Human 人 OLFM4 / Olfactomedin-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )質(zhì)量規(guī)格：D,99.9%Dimethyl Sulfoxide-D6

CM-H053人細胞完全培養(yǎng)基100mL氘代DMSO-D6(10 g )質(zhì)量規(guī)格：D,99.8%+TMS 0.03%Dimethyl Sulfoxide-D6

DIRAS3 Others Human 人 ARHI / DIRAS3 人細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白酶K(進分)質(zhì)量規(guī)格：≥30units/mg protein,sigma分裝Proteinase K

人海馬星形膠質(zhì)細胞HA-h蛋白酶K(Sigma)質(zhì)量規(guī)格：≥30units/mg protein,sigma原裝Proteinase K

Hs 181.Tes細胞，正常人細胞 人癌細胞,HCC1937細胞 平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM-sf胰凝乳蛋白酶抑制劑質(zhì)量規(guī)格：進分Chymostatin
人脂肪微內(nèi)皮細胞HAMEC抗壞血酸；維生素C質(zhì)量規(guī)格：AR;>99%Ascorbic acid；vitamin C

CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 維生素C(標準品)質(zhì)量規(guī)格：含量測定Ascorbic acid；vitamin C

非洲綠猴腎細胞;VERO十八胺; 十八烷基胺; 硬脂胺質(zhì)量規(guī)格：AROctadecanamine

NCI-H157細胞，人非小細胞 小鼠細胞,S-180細胞 CM-R039大鼠胃粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL山梨酸質(zhì)量規(guī)格：AR,99%Sorbic acid

RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞細胞) 5×106cells/瓶×2DL-薄荷醇質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品DL-Menthol
反應五要素：
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。