實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

四甲基化銨 100g  4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene  1533-45-5 中文名：4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪 分子式：C28H18N2O2 度：98.0%

水質(zhì)檢測儀、比色計(jì)試劑 Water quality detector, colorimeic reage  4-(Phenylthio)benzyl alcohol  6317-56-2 中文名： 分子式：C13H12OS 度：98.0% 關(guān)鍵詞：

水質(zhì)讀卡儀器 Water quality reading card insume  4-(N-Methyl)-aminoantipyrine  519-98-2 中文名： 分子式：C12H15N3O 度：95.0% 關(guān)鍵詞：

水硬度快速測試盒 Water hardness rapid test case α-Spinasterol glucoside  1745-36-4 中文名：α-菠甾醇葡萄糖苷 分子式：C35H58O6 度：97.0% 關(guān)鍵詞： ; 豆甾烷; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

水樣中六價(jià)鉻離子（Cr6+）濃度測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl  147118-37-4 中文名： 分子式：C16H18FN3O3S
3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞 MouseD-氨基葡萄糖鹽酸鹽D-Glucosamine 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

TNFRSF10A Others Human  TNFRSF10A / CD261 / APO2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 奧卡西平Oxcarbazepine質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%,BR

細(xì)胞;SMMC-7721奧卡西平（標(biāo)準(zhǔn)品）Oxcarbazepine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

3. 毛發(fā)細(xì)胞系統(tǒng)金絲桃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Hypericin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠神經(jīng)干細(xì)胞D-葡萄糖-6-1酸D-（+）-Glucopyranose 6-phosphate質(zhì)量規(guī)格：1M in H2O(260Mg/ml),進(jìn)口原裝
BxPC-3, 原位*腺癌細(xì)胞株米帕明/丙咪嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）Clomipramine HCL 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

急性早幼粒細(xì)胞;HL-60 大鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL硫酸氫氯吡格雷 I型Clopidogrel Bisulfate質(zhì)量規(guī)格：>98%,I型

原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml硫酸氫氯吡格雷 II型(標(biāo)準(zhǔn)品)Clopidogrel Bisulfate質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

FAS Others Cynomolgus 食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硫酸氫氯吡格雷 II型Clopidogrel Bisulfate質(zhì)量規(guī)格：含量97.0%-101.5%，II型

D型病毒PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24萘丁美酮/萘普酮Nabumetone質(zhì)量規(guī)格：>99%
Prosapogenin A  中文名：薯蕷次皂苷A 分子式：C39H62O12 度：% 兔熱休克蛋白70elisa試劑盒 兔熱休克蛋白70試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔熱休克蛋白70試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔熱休克蛋白70試劑盒、兔熱休克蛋白70elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。

2''-O-Acetylsprengerinin C  中文名： 分子式：C46H72O17 度：% 兔熱休克蛋白40elisa試劑盒 兔熱休克蛋白40試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔熱休克蛋白40試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔熱休克蛋白40試劑盒、兔熱休克蛋白40 elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。

Dehydroepiandrosterone  中文名：脫氫表雄酮 分子式：C19H28O2 度：99.0% 兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Gracillin  中文名：纖細(xì)薯蕷皂苷 分子式：C45H72O17 度：98.0% 兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside 中文名： 分子式：C56H90O19 度：97.5% 兔抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T