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東西部馬腦脊髓炎病毒(VV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)使用方法

發(fā)表時間:2021-10-22
東西部馬腦脊髓炎病毒(VV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)使用方法:

一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體
三磷酸腺苷酶家族蛋白3A抗體
載脂蛋白J抗體
載脂蛋白H抗體
二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶4抗體
AKIRIN2蛋白抗體
ADP核糖基化樣因子8B抗體
三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗體
AKIRIN1蛋白抗體
錨定蛋白樣蛋白1抗體
腺苷酸激酶2抗體
精子頂體前體蛋白抗體
黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體
未知糖基化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體
鐵蛋白Fe65抗體
抑癌基因ras同源家族1抗體
轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體
心鈉素抗體
丙氨酰tRNA合成酶2抗體
絲氨酸抑制蛋白激酶C底物抗體
核突觸蛋白α抗體
自噬相關(guān)蛋白4B抗體
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12抗體


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