植物總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

植物總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。

HCT-8(人盲腸腺癌細(xì)胞)
HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞)
HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞)
Hela(人宮頸癌細(xì)胞)
Hep 3B(人肝癌細(xì)胞)
Hep G2(人肝癌細(xì)胞)
HEp-2(人喉表皮樣癌細(xì)胞)
Hepa 1-6(小鼠肝癌細(xì)胞)
HFL1(人肺成纖維細(xì)胞)
HGC-27(人胃癌細(xì)胞)
HIC(人小腸癌細(xì)胞)
HK-2(人腎小管上皮細(xì)胞)
HL-60(人早幼粒急性白血病細(xì)胞)
HL-7702(人肝正常細(xì)胞)
HMy2.CIR(人B淋巴母細(xì)胞)
HO-8910(人卵巢癌細(xì)胞)
Hs 578T(人乳腺癌細(xì)胞)
Hs 746T(人胃癌細(xì)胞)
HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞)
HT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞)
HT-29(人結(jié)腸癌細(xì)胞)
HuH-6(人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞)
HuH-7(人肝癌細(xì)胞)
Hut-102(人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞)
HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞)
IBRS-2(豬腎細(xì)胞)
IMR-32(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)
J82(人膀胱癌細(xì)胞)
JAR(人胎盤(pán)絨毛膜癌細(xì)胞)
JEG-3(人絨毛膜癌細(xì)胞)
JeKo-1(人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)
Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)
K-562(人慢性骨髓性白血病細(xì)胞)
KB(人口腔表皮樣癌細(xì)胞)
KG-1(人急性骨髓性白血病細(xì)胞)
KLE(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞)
KU812(人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞)
L1210(小鼠白血病細(xì)胞)
L6(大鼠成肌細(xì)胞)
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維
Lec1(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)
Li-7(人肝癌細(xì)胞)