FAS試劑盒異常時(shí),最常見(jiàn)3個(gè)排查
發(fā)表時(shí)間:2025-12-24
FAS試劑盒異常時(shí),最常見(jiàn)3個(gè)排查點(diǎn)如下:
試劑相關(guān)問(wèn)題:檢查試劑是否過(guò)期、變質(zhì)或保存不當(dāng)。特別是凍干標(biāo)記物,需確保按照瓶上標(biāo)簽用蒸餾水準(zhǔn)確溶解,并在2-8℃最多存放兩周。
操作步驟問(wèn)題:確認(rèn)實(shí)驗(yàn)操作步驟是否正確,包括試劑加入順序、溫育時(shí)間等。例如,稀釋標(biāo)記物時(shí)應(yīng)先在塑料瓶中加入較多體積的實(shí)驗(yàn)緩沖液,再加入標(biāo)記物,并確保完全混合。
設(shè)備與環(huán)境問(wèn)題:檢查實(shí)驗(yàn)設(shè)備(如酶標(biāo)儀、移液器等)是否正常工作,以及實(shí)驗(yàn)環(huán)境是否符合要求(如溫度、濕度等)。確保實(shí)驗(yàn)緩沖液標(biāo)簽正確,標(biāo)記物使用前1小時(shí)內(nèi)用對(duì)應(yīng)試劑盒內(nèi)的實(shí)驗(yàn)緩沖液按比例稀釋?zhuān)⑶蚁♂寴?biāo)記物必須使用一次性塑料瓶。
反應(yīng)溫度與儀器參數(shù)(確保“檢測(cè)條件正確”)
溫度每偏離37℃±1℃,F(xiàn)AS活性波動(dòng)10%;儀器波長(zhǎng)錯(cuò)設(shè)(如450nm而非340nm)會(huì)直接導(dǎo)致“測(cè)不到信號(hào)”,這是最容易被忽略的“低級(jí)錯(cuò)誤”。
溫度校準(zhǔn):用溫度計(jì)實(shí)測(cè)水浴鍋/金屬浴溫度(而非依賴(lài)設(shè)備顯示),確保37℃±0.5℃;反應(yīng)管需完全浸入水中(避免漂浮導(dǎo)致局部溫度低)。
儀器設(shè)置:
波長(zhǎng)必須為340nm(NADPH的特征吸收峰);
比色皿光徑是否為1cm(若用0.5cm,需在計(jì)算公式中修正d=0.5);
分光光度計(jì)是否預(yù)熱30分鐘(開(kāi)機(jī)直接測(cè)會(huì)導(dǎo)致讀數(shù)漂移)。
以上排查點(diǎn)有助于快速定位并解決FAS試劑盒異常問(wèn)題。